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小麥和面粉中嘔吐毒素污染現(xiàn)狀、危害及降解方法

時(shí)間:2016-07-31來(lái)源:飛測(cè)生物點(diǎn)擊量:

一.小麥赤霉病流行現(xiàn)狀

      小麥赤霉病是由禾谷鐮刀菌、黃色鐮刀菌等真菌引起的一種世界性小麥病害,多發(fā)生在氣候溫潤(rùn)多雨的的國(guó)家和地區(qū)(亞洲、北美洲等),發(fā)生、流行主要取決于適宜發(fā)病的暖濕氣候條件,會(huì)造成小麥減產(chǎn)、品質(zhì)劣變、籽粒毒素(DON)污染。
       據(jù)報(bào)道,2016年夏季麥?zhǔn)占竟?jié),江蘇、安徽、湖北等地連續(xù)陰雨,赤霉病發(fā)生情況嚴(yán)重:江蘇徐州:預(yù)計(jì)減產(chǎn)2成,赤霉病嚴(yán)重,不完善粒預(yù)計(jì)在25%左右;安徽亳州:赤霉病、芽麥嚴(yán)重,預(yù)計(jì)減產(chǎn)2成,不完善粒達(dá)25%;湖北隨縣:不完善粒超標(biāo),赤霉病發(fā)生;蘇南蘇中:赤霉病發(fā)生、芽麥可達(dá)20-30%。

 2016年小麥赤霉病發(fā)病趨勢(shì)圖

二.食物鏈中的嘔吐毒素
       脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON),俗稱(chēng)“嘔吐毒素”(vomitoxin),它是禾谷鐮刀菌和黃色鐮刀菌等真菌侵染谷物后所產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物,是赤霉病小麥中最主要的真菌毒素。
 嘔吐毒素理化性質(zhì)
赤霉病小麥中嘔吐毒素DON含量的變化進(jìn)程
赤霉病小麥中DON含量的變化進(jìn)程 
小麥籽粒中的嘔吐毒素DON
 

1、小麥制品中的嘔吐毒素DON
       嘔吐毒素主要分布在小麥籽粒中的皮層部位,小麥經(jīng)過(guò)初期加工后,毒素主要轉(zhuǎn)移至麩皮中,因此麩皮即成為小麥初加工產(chǎn)品中最易被DON污染的基質(zhì);面粉中雖然嘔吐毒素DON含量低,但污染范圍廣。
百奧明飼料公司對(duì)2012年市場(chǎng)中31份麩皮樣品分析,發(fā)現(xiàn)其中嘔吐毒素DON含量最高達(dá)5777 μg/kg,平均含量為997 μg/kg。
       王淞等對(duì)我國(guó)山東、河北、吉林等10個(gè)地區(qū)小麥粉中嘔吐毒素污染情況進(jìn)行了調(diào)查,發(fā)現(xiàn)樣品嘔吐毒素DON檢出率為30%,最高含量為862 μg/kg,未超過(guò)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)限量規(guī)定,但嘔吐毒素DON的污染較為廣泛,且存在一定的膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)。
2、面條中的嘔吐毒素DON
       朱惠揚(yáng)(2013)對(duì)廣州市農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)和超市中面粉及其加工食品進(jìn)行采樣檢測(cè)。結(jié)果檢測(cè)100份樣品,嘔吐毒素DON總檢出率為71%,平均含量為49.5 μg/kg;其中面條中嘔吐毒素DON最高含量達(dá)920.1 μg/kg,存在較高膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)。
 
3、發(fā)酵食品中的嘔吐毒素DON
       食品在發(fā)酵過(guò)程中,由于合適的溫濕度條件,容易被真菌毒素污染。
       吳靜(2013)研究了普洱茶發(fā)酵中真菌毒素的污染情況,發(fā)現(xiàn)所檢樣品中有38%的樣品嘔吐毒素DON含量超標(biāo)(1 mg/Kg),且有27%的樣品超標(biāo)2倍以上;釀酒過(guò)程中,嘔吐毒素會(huì)在浸泡、發(fā)芽、烘干、發(fā)酵的過(guò)程中產(chǎn)生,Schwarz(1995)發(fā)現(xiàn)與原始大麥樣品相比,發(fā)酵五天后的麥芽中嘔吐毒素DON含量增加了18-114%;Zachariasova(2012)采用Q-E測(cè)定制酒過(guò)程中嘔吐毒素DON侵染的狀況,結(jié)果顯示在芽麥和啤酒中 嘔吐毒素DON的含量為5.6-139 μg/kg。
4、飼料及其原料中的DON
 

三.嘔吐毒素的危害
1、嘔吐毒素DON對(duì)谷物的危害
       嘔吐毒素DON會(huì)造成谷物產(chǎn)量嚴(yán)重?fù)p失、品質(zhì)下降、毒素污染。
2、嘔吐毒素DON對(duì)人和動(dòng)物的危害
       人誤食含有嘔吐毒素DON的食物后, 常會(huì)引起四肢無(wú)力、頭昏、發(fā)熱、腹脹、腹瀉和嘔吐等癥狀;豬對(duì)嘔吐毒素DON最敏感,飼料中還有1-2ppm的嘔吐毒素DON即可引起豬中毒;豬食用含有嘔吐毒素DON的飼料后會(huì)引起厭食、嘔吐、腸出血、肺部出血,對(duì)懷孕母豬甚至?xí)鹆鳟a(chǎn);動(dòng)物對(duì)嘔吐毒素DON的敏感性:豬>小鼠>大鼠>家禽≈反芻動(dòng)物;雄性>雌性;幼畜>  成年畜。
3、嘔吐毒素DON的一般毒性
       嘔吐毒素DON在歐盟分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)中為三級(jí)致癌物,雖不及T-2毒素的毒性強(qiáng)烈,但因其污染率和污染水平均居單端孢霉烯族毒素之首,并常與其他真菌毒素協(xié)同作用于人體,產(chǎn)生廣泛的毒性效應(yīng),如急性毒性、慢性和亞慢性毒性、細(xì)胞毒性、免疫毒性等多種毒性作用。
       嘔吐毒素DON急性中毒癥狀一般表現(xiàn)為站立不穩(wěn)、反應(yīng)遲鈍、嗜睡、食欲喪失、嘔吐、腹瀉等;慢性毒性則表現(xiàn)為肝臟、腎臟、胃腸道等臟器損傷、體重嚴(yán)重下降、出現(xiàn)免疫功能障礙和生殖功能障礙;致吐作用:嘔吐是人和動(dòng)物嘔吐毒素DON中毒最主要的癥狀,其中豬的致吐作用最明顯,約為其他動(dòng)物的100-200倍;致吐機(jī)理主要是嘔吐毒素DON對(duì)粘膜以及神經(jīng)系統(tǒng)的刺激作用。
4、嘔吐毒素DON的細(xì)胞毒性
       嘔吐毒素DON對(duì)原核細(xì)胞和真核細(xì)胞都存在明顯的毒性作用。
       原核細(xì)胞:一是通過(guò)滲透磷脂雙層,作用于亞細(xì)胞水平;二是通過(guò)與細(xì)胞膜相互作用;三是通過(guò)自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化作用。真核細(xì)胞:嘔吐毒素DON毒素可結(jié)合到真核生物核糖體60s亞基并干擾肽基轉(zhuǎn)移酶的活性,抑制蛋白、DNA、RNA合成,抑制線(xiàn)粒體功能、影響細(xì)胞分裂和細(xì)胞膜功能。
 
5、嘔吐毒素DON的免疫毒性
      嘔吐毒素 DON 毒素通過(guò)改變宿主抵抗力和體液細(xì)胞調(diào)解反應(yīng),改變血清 IgA 水平、細(xì)胞因子表達(dá),引起淋巴組織的細(xì)胞凋亡;小鼠飼喂含有嘔吐毒素DON的飼料,會(huì)呈現(xiàn)出和人類(lèi)腎小球腎炎相似的病狀,即IgA腎??;嘔吐毒素DON可使血清中IgA和 IgE 含量升高。
 
6、嘔吐毒素DON的“三致”作用
       當(dāng)前國(guó)內(nèi)外對(duì)嘔吐毒素DON毒素致突變、致畸和致癌作用的研究結(jié)果并不一致,大多數(shù)研究結(jié)果表明該毒素具有胚胎毒性和致畸性,可能是一種潛在的致癌物質(zhì)。
       用嘔吐毒素DON毒素純品做Ames實(shí)驗(yàn)、誘導(dǎo)細(xì)胞染色體畸變實(shí)驗(yàn)等,均顯示嘔吐毒素DON會(huì)引起突變和致畸;有關(guān)嘔吐毒素DON毒素與關(guān)節(jié)軟骨病變及惡性腫瘤的亞慢性實(shí)驗(yàn)研究中證實(shí),嘔吐毒素DON可以導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物軟骨損傷;1993年,國(guó)際癌癥研究中心(IARC)認(rèn)為“目前還沒(méi)有充分的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證據(jù)說(shuō)明DON毒素具有致癌性”,因此將其歸為第三組即“對(duì)人類(lèi)不產(chǎn)生致癌性”。
7、嘔吐毒素的限量標(biāo)準(zhǔn)
 
世界各國(guó)對(duì)小麥中嘔吐毒素DON的限量標(biāo)準(zhǔn)
 
四.嘔吐毒素消減技術(shù)
1、物理消減法
       谷物清理:去雜去石、風(fēng)選、色選、比重分選、漂洗、浸泡;谷物加工:堿性溶液潤(rùn)麥、分層碾磨、制粉;面制品加工:堿水和面、高溫蒸煮、面包烘焙、煎炸;吸附劑:鋁硅酸鹽、活性炭、高分子聚合物等;射線(xiàn)輻照:紫外線(xiàn)、60Co-γ射線(xiàn)、電子束;熱處理:微波干燥、過(guò)熱蒸汽處理、擠壓膨化處理等。
清理和浸泡對(duì)小麥中嘔吐毒素DON的影響
 
研磨制粉對(duì)小麥中嘔吐毒素DON的影響
 
面制品加工對(duì)嘔吐毒素DON的影響
 
面條加工過(guò)程對(duì)嘔吐毒素DON的影響
 
 
輻照——60Co-γ 射線(xiàn) 
 
       輻照——電子束
       電子束輻照是利用電子加速器產(chǎn)生的低能或高能電子束射線(xiàn)對(duì)物質(zhì)進(jìn)行處理的方法。
       其作用方式有兩種:一是通過(guò)高能脈沖直接穿透對(duì)象,破壞其中活體生物細(xì)胞內(nèi)DNA,如利用電子束射線(xiàn)殺滅肉制品或谷物中的微生物或病蟲(chóng);二是利用發(fā)出的射線(xiàn)間接與水分子反應(yīng),產(chǎn)生H?、?OH 等活性自由基,自由基再與對(duì)象發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。
       熱處理
       加熱處理是一種比較常見(jiàn)的殺菌脫毒方法,包括烘烤、油炸、過(guò)熱蒸汽處理、擠壓、微波處理等。
       Kottapalli等(2006)研究表明,熱水處理可以減少谷物中DON毒素的含量,但處理效果同時(shí)還受谷物顆粒大小或密度變化的影響;Samar 等(2007)的研究表明受真菌毒素污染的小麥面團(tuán)在169℃、205℃和243℃三個(gè)溫度下油炸后,DON的含量分別降低 28%、21%和 20%;Pronyk(2006)采用過(guò)熱蒸汽經(jīng)過(guò)185℃處理6min可使小麥中DON毒素含量降低52%;Bong Joo Park(2008)采用微波輔助等離子體作用于真菌毒素,結(jié)果顯示5s內(nèi)可將DON完全降解。
2、化學(xué)降解法
       堿性化:DON在堿性條件下會(huì)打開(kāi)C-12,13位的環(huán)氧基,通過(guò)醇醛縮合反應(yīng)形成內(nèi)酯結(jié)構(gòu),從而降低毒性。
       氧化:臭氧、雙氧水等氧化劑可以改變DON的分子結(jié)構(gòu),從而改變其生物活性;臭氧易攻擊DON分子結(jié)構(gòu)中C-9、10位的雙鍵,在此結(jié)構(gòu)上加上兩分子的氧,從而降低其毒性。
       化學(xué)試劑:碳酸鈉(Na2CO3)、碳酸氫鈉(NaHCO3)、亞硫酸氫鈉(NaHSO3)和焦亞硫酸鈉(Na2S2O5)等化學(xué)試劑可以降解DON,使其結(jié)構(gòu)發(fā)生變化;如NaHSO3和Na2S2O5可以將DON轉(zhuǎn)化成毒性較低的磺化-DON。
       1)、化學(xué)試劑
       含有嘔吐毒素DON的發(fā)霉玉米在室溫下經(jīng)過(guò)氨水溶液處理1h、18h,其嘔吐毒素DON含量分別降低9%和85%(Young,1986);謝茂昌等(2000)對(duì)Na2CO3、NaHSO3、H2O2等化學(xué)試劑的DON毒素脫除效果進(jìn)行了比較分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn),對(duì)麥粒的脫毒效果以0.1mol/L的Na2CO3為最好,毒素去除率平均為83.9%;其次是1%的NaHSO3,毒素去除率平均為69.9%;4% H2O2的毒素去除率最低,平均為45.1%;室溫條件下,采用2%的抗壞血酸處理24h,可以使小麥中的DON含量降低50% (Young,1986)。
       2)、臭氧
 
臭氧可以氧化降解嘔吐毒素DON,改變其分子結(jié)構(gòu),從而降低其毒性。
       臭氧首先在嘔吐毒素DON結(jié)構(gòu)中的C-9和C-10雙鍵上加入三個(gè)氧原子,生成過(guò)氧化物,過(guò)氧化物不穩(wěn)定,發(fā)生異構(gòu)化生成五元環(huán)化合物,然后在Zn的作用下發(fā)生水解,五元環(huán)化合物的C-O鍵和O-O鍵斷裂,最后在C-9和C-10位上分別形成醛基和羰基,分子的其他部分沒(méi)有改變。
       臭氧降解對(duì)面條品質(zhì)的影響
       經(jīng)過(guò)臭氧處理30 min和60 min后面粉和面條的白度、面團(tuán)穩(wěn)定性、小麥淀粉的峰值粘度都有一定程度的提高;經(jīng)過(guò)臭氧處理的面條具有更強(qiáng)的韌性、彈性和耐咀嚼性,然而,粘度特性卻很低;經(jīng)過(guò)臭氧處理的面粉制作的面條可以在很大程度上延緩微生物的生長(zhǎng)和面條的褐變。
3、生物脫毒法
       應(yīng)用微生物競(jìng)爭(zhēng)來(lái)抑制真菌毒素、采用發(fā)酵工程技術(shù)降解真菌毒素、微生物降解真菌毒素、利用酶降解真菌毒素。生物脫毒作用基團(tuán):C-12,13環(huán)氧基團(tuán)、C-3羥基等生物脫毒作用機(jī)理:水解作用、水合作用、糖苷化反應(yīng)、異構(gòu)化作用等。

      飛測(cè)生物基于熒光定量POCT檢測(cè)技術(shù)平臺(tái),推出了嘔吐毒素?zé)晒舛繖z測(cè)卡(熒光定量免疫層析法)嘔吐毒素檢測(cè)儀,可在10min內(nèi)快速定量檢測(cè)各種糧食谷物、油料作物、糧油、飼料原料及部分飼料中嘔吐毒素的含量,樣品前處理簡(jiǎn)單,操作簡(jiǎn)便,采用熒光讀數(shù)儀讀數(shù),結(jié)果準(zhǔn)確可靠,適用于各類(lèi)糧食、糧油、飼料加工企業(yè)及檢測(cè)機(jī)構(gòu)。

一、嘔吐毒素?zé)晒?/span>定量測(cè)試紙條性能
1、 靈敏度:25ng/mL;
2、 定量線(xiàn)性范圍:50.0ng/mL - 5000.0 ng/mL;

3、樣品前處理時(shí)間:8min;

4、檢測(cè)時(shí)間:10min;
5、準(zhǔn)確度:添加回收率為80%-125%;
6、 特異性:在1000 ng/mL濃度水平下與其它真菌毒素?zé)o交叉反應(yīng);

嘔吐毒素定量檢測(cè)卡

二、嘔吐毒素?zé)晒?/span>定量測(cè)卡樣品前處理過(guò)程      

嘔吐毒素?zé)晒舛繖z測(cè)試紙條前處理


三、嘔吐毒素?zé)晒?/span>定量測(cè)卡檢測(cè)過(guò)程操作示意圖 
嘔吐毒素?zé)晒舛繖z測(cè)試紙條操作過(guò)程


四、嘔吐毒素檢測(cè)儀結(jié)果判讀和輸出
      嘔吐毒素?zé)晒舛繖z測(cè)采用便攜式嘔吐毒素檢測(cè)儀進(jìn)行讀數(shù),使得檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確、客觀,避免人為的誤判。

嘔吐毒素檢測(cè)儀

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