霉菌毒素的種類及快速定量檢測(cè)方法

一、霉菌毒素的常見(jiàn)種類及危害     

      霉菌毒素是一大類毒性強(qiáng)弱不同的霉菌次級(jí)代謝產(chǎn)物，通常的一種霉菌能產(chǎn)生一種或多種次級(jí)代謝產(chǎn)物, 而同種的霉菌毒素又可由不同的霉菌所產(chǎn)生。有研究證實(shí)，只要有適宜的環(huán)境下，霉菌毒素可以在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的任何環(huán)節(jié)中產(chǎn)生。根據(jù)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織FAO報(bào)道，世界上每年有大約25%的谷物被各種霉菌毒素污染，現(xiàn)已知的霉菌毒素已超過(guò)400種，但并不是每種霉菌毒素都有毒。糧食谷物飼料中常見(jiàn)的霉菌毒素有以下幾種：  

      黃曲霉毒素：這是一種最為常見(jiàn)的毒素，主要是由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物。黃曲霉毒素被動(dòng)物采食后，迅速的被胃腸道所吸收，它在肝臟中的濃度最高，所以肝臟的受害最嚴(yán)重。肝為機(jī)體重要的免疫器官和代謝器官，一旦受損會(huì)導(dǎo)致全身性出血、消化機(jī)能出現(xiàn)障礙和神經(jīng)癥狀。
      玉米赤霉烯酮：又稱F-2毒素，主要為禾谷鐮刀菌屬的一種代謝產(chǎn)物，屬于鐮刀菌的毒素類，它主要影響動(dòng)物的生殖系統(tǒng)。玉米赤霉烯酮可促進(jìn)子宮DNA、RNA以及蛋白質(zhì)的生物合成，使動(dòng)物發(fā)生雌激素引發(fā)的亢進(jìn)癥，所以又被稱為類動(dòng)情毒素。該毒素可使母豬外陰持續(xù)性紅腫，這種紅腫癥狀通常被誤認(rèn)為是母豬的發(fā)情，但出現(xiàn)癥狀的母豬卻不接受公豬爬跨的配種。其對(duì)公豬的影響也很顯著，可導(dǎo)致性欲低下、精液量減少、密度降低，精子萎縮、變形，或畸形率增加等。
      嘔吐毒素：在早期階段中，嘔吐毒素DON能導(dǎo)致皮膚刺激，缺乏食欲，嘔吐；在后期，則會(huì)引起出血、消化道的壞疽、中樞神經(jīng)的系統(tǒng)性問(wèn)題、免疫系統(tǒng)的破壞、骨髓造血功能的衰退以及生殖功能的衰退等。  

      赭曲霉毒素：與黃曲霉毒素有些相似，主要侵害肝臟和腎臟。它可使腸道相關(guān)淋巴組織壞死，降低吞噬細(xì)胞吞噬的作用，影響細(xì)胞的免疫功能和體液免疫功能。母豬長(zhǎng)期過(guò)量飼喂赭曲霉毒素污染的飼料，有可能影響后代的免疫機(jī)能。 

      T-2毒素：它是三線鐮刀菌、擬技孢鐮刀菌、梨孢鐮刀菌等的有毒代謝產(chǎn)物，屬于鐮刀菌類毒素。T-2毒素有較強(qiáng)的細(xì)胞生物毒性，可破壞組織黏膜的完整性，導(dǎo)致免疫細(xì)胞的功能下降，引起貧血、出血。由于T-2毒素能刺激腸道黏膜，因此還會(huì)引起豬的嘔吐和腹瀉。
　　煙曲霉毒素（伏馬菌素）：該毒素常出現(xiàn)于玉米產(chǎn)區(qū)，它對(duì)機(jī)體呼吸道的損傷比較嚴(yán)重。有的豬場(chǎng)呼吸道問(wèn)題總是反復(fù)難以治愈，可考慮是不是煙曲霉毒素在其中作怪。另外該毒素中毒后豬的生產(chǎn)性能和繁殖性能也遭到破壞，明顯的癥狀是胚胎發(fā)育受損，免疫機(jī)能降低。
　　麥角毒素：由麥角菌產(chǎn)生，該毒素可縮小血管，限制血液的供給，尤其是限制血液向乳腺和機(jī)體末梢的供應(yīng)。對(duì)于霉菌毒素的危害，預(yù)防是主要的，不要使用發(fā)生霉變的飼料及原料。我們?cè)谫?gòu)進(jìn)玉米等原料時(shí)，要認(rèn)真挑選，不要圖一時(shí)便宜給自己留下后患，盡量在源頭上做到杜絕霉菌毒素。但是，天氣也是一個(gè)不容忽視的因素，在當(dāng)前潮濕高溫的天氣里，妥善保存飼料顯得尤為重要。

二、霉菌毒素的快速定量檢測(cè)方法

      目前檢測(cè)霉菌毒素的主要分為兩大類：即確認(rèn)方法和快速方法。確認(rèn)方法主要基于理化儀器設(shè)備，如薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)和各種聯(lián)用技術(shù)如氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)、液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)等；快速方法主要是基于免疫化學(xué)基礎(chǔ)上的免疫分析方法如免疫親合柱-熒光檢測(cè)(IAC-FLD)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELlSA)和膠體金免疫層析方法等。

      結(jié)果準(zhǔn)確、法定認(rèn)可是理化方法最大的優(yōu)點(diǎn)，但是儀器設(shè)備價(jià)格昂貴，前處理過(guò)程復(fù)雜、操作繁瑣、效率低，成本極高，因此不適用于大規(guī)模樣本的篩查和日常的內(nèi)控檢測(cè)。酶聯(lián)免疫吸附法ELISA 方法和膠體金快速檢測(cè)卡是企業(yè)常用的快速檢測(cè)方法，但也均存在各自的優(yōu)缺點(diǎn)：ELISA 方法能靈敏度相對(duì)較高，且能定量檢測(cè)，但操作的過(guò)程相對(duì)復(fù)雜，步驟較多，檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，對(duì)環(huán)境和人員要求高，環(huán)境和基質(zhì)干擾嚴(yán)重，且需要使用標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)操作人員危害比較大；膠體金檢測(cè)卡可以滿足現(xiàn)場(chǎng)快速的要求，能在5-10min內(nèi)快速測(cè)定，但是只能定性，且靈敏度較低，肉眼觀察主觀性較強(qiáng)，重復(fù)性差。

      上海飛測(cè)生物科技有限公司基于領(lǐng)先的熒光定量FPOCT技術(shù)平臺(tái)，開(kāi)發(fā)出了國(guó)內(nèi)首套霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)系統(tǒng)（包含霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)試紙條和霉菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)儀），該系統(tǒng)結(jié)合了膠體金快速、酶聯(lián)免疫定量以及色譜法準(zhǔn)確的特點(diǎn)，僅需8min快速準(zhǔn)確定量的測(cè)定出糧油谷物及飼料中的霉菌毒素，包括黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素A、伏馬菌素、T2毒素等霉菌毒素的殘留含量，樣品前處理簡(jiǎn)單（僅需8min），檢測(cè)操作簡(jiǎn)便，靈敏度高，線性范圍寬，采用熒光免疫定量分析儀讀數(shù)，結(jié)果準(zhǔn)確可靠且可現(xiàn)場(chǎng)打印，準(zhǔn)確性符合HPLC法的檢測(cè)結(jié)果，適用于各類糧油、飼料加工企業(yè)、養(yǎng)殖場(chǎng)、牧場(chǎng)、檢測(cè)機(jī)構(gòu)及政府相關(guān)監(jiān)管部門。

2.1上海飛測(cè)霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)系統(tǒng)的特點(diǎn)

• 8min快速準(zhǔn)確定量： 集膠體金快速檢測(cè)、酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)、色譜質(zhì)譜準(zhǔn)確檢測(cè)的特點(diǎn)于一身，可在8min內(nèi)實(shí)現(xiàn)黃曲霉毒素的快速準(zhǔn)確定量測(cè)定；
• 樣品前處理六合一：只需要一次樣品前處理即可進(jìn)行所有真菌毒素的定量檢測(cè)，大大減少您樣品前處理的工作量，提高工作效率。
• 小巧便攜：既可用于實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)，也可用于收糧現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)；
• 內(nèi)置定量標(biāo)準(zhǔn)曲線：儀器內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線，無(wú)需檢測(cè)時(shí)再做標(biāo)準(zhǔn)曲線，既節(jié)省了成本，也避免了操作人員與霉菌毒素的接觸，保護(hù)操作人員的安全；
• 隨到隨檢：對(duì)檢測(cè)樣本量無(wú)要求，既可單個(gè)或少量樣本隨到隨檢，也可大量樣本同時(shí)檢測(cè)，檢測(cè)成本無(wú)區(qū)別；
• 基質(zhì)干擾?。?/strong>基于時(shí)間分辨熒光技術(shù)原理，有效降低基質(zhì)干擾，既適用于小麥、玉米、高粱等原料檢測(cè)，也可對(duì)DDGS，麩皮、粕類等特殊樣本檢測(cè)，無(wú)需對(duì)提取液進(jìn)行任何pH的調(diào)節(jié)，操作方便，結(jié)果準(zhǔn)確；
• 操作簡(jiǎn)便：樣品提取完后僅需一步加樣即可，操作及其簡(jiǎn)便赫人性化，操作人員僅需短期培訓(xùn)就能熟練掌握；
• 遠(yuǎn)程網(wǎng)絡(luò)支持：儀器可通過(guò)網(wǎng)絡(luò)自動(dòng)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取、軟件升級(jí)、問(wèn)題故障診斷、質(zhì)量控制等；
• 數(shù)據(jù)上傳及溯源管理：熒光定量分析儀具備數(shù)據(jù)無(wú)線上傳的功能，可根據(jù)客戶的需求定制開(kāi)發(fā)相應(yīng)的數(shù)據(jù)管理和溯源管理系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)公司總部對(duì)各分公司、上級(jí)監(jiān)管部門對(duì)下級(jí)監(jiān)管部門或者監(jiān)管部門對(duì)各監(jiān)管對(duì)象檢測(cè)數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)掌握和分析；
• 性價(jià)比高：花膠體金試紙條的價(jià)格，獲得色譜質(zhì)譜檢測(cè)的質(zhì)量和結(jié)果，并且節(jié)省人力物力，大幅降低檢測(cè)費(fèi)用；