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霉菌毒素的種類及快速定量檢測方法

時間:2017-04-15來源:飛測生物點擊量:

一、霉菌毒素的常見種類及危害     

      霉菌毒素是一大類毒性強弱不同的霉菌次級代謝產(chǎn)物,通常的一種霉菌能產(chǎn)生一種或多種次級代謝產(chǎn)物, 而同種的霉菌毒素又可由不同的霉菌所產(chǎn)生。有研究證實,只要有適宜的環(huán)境下,霉菌毒素可以在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的任何環(huán)節(jié)中產(chǎn)生。根據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織FAO報道,世界上每年有大約25%的谷物被各種霉菌毒素污染,現(xiàn)已知的霉菌毒素已超過400種,但并不是每種霉菌毒素都有毒。糧食谷物飼料中常見的霉菌毒素有以下幾種:  

      黃曲霉毒素:這是一種最為常見的毒素,主要是由黃曲霉和寄生曲霉產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物。黃曲霉毒素被動物采食后,迅速的被胃腸道所吸收,它在肝臟中的濃度最高,所以肝臟的受害最嚴重。肝為機體重要的免疫器官和代謝器官,一旦受損會導致全身性出血、消化機能出現(xiàn)障礙和神經(jīng)癥狀。
      玉米赤霉烯酮:又稱F-2毒素,主要為禾谷鐮刀菌屬的一種代謝產(chǎn)物,屬于鐮刀菌的毒素類,它主要影響動物的生殖系統(tǒng)。玉米赤霉烯酮可促進子宮DNA、RNA以及蛋白質(zhì)的生物合成,使動物發(fā)生雌激素引發(fā)的亢進癥,所以又被稱為類動情毒素。該毒素可使母豬外陰持續(xù)性紅腫,這種紅腫癥狀通常被誤認為是母豬的發(fā)情,但出現(xiàn)癥狀的母豬卻不接受公豬爬跨的配種。其對公豬的影響也很顯著,可導致性欲低下、精液量減少、密度降低,精子萎縮、變形,或畸形率增加等。
      嘔吐毒素:在早期階段中,嘔吐毒素DON能導致皮膚刺激,缺乏食欲,嘔吐;在后期,則會引起出血、消化道的壞疽、中樞神經(jīng)的系統(tǒng)性問題、免疫系統(tǒng)的破壞、骨髓造血功能的衰退以及生殖功能的衰退等。  

      赭曲霉毒素:與黃曲霉毒素有些相似,主要侵害肝臟和腎臟。它可使腸道相關淋巴組織壞死,降低吞噬細胞吞噬的作用,影響細胞的免疫功能和體液免疫功能。母豬長期過量飼喂赭曲霉毒素污染的飼料,有可能影響后代的免疫機能。 

      T-2毒素:它是三線鐮刀菌、擬技孢鐮刀菌、梨孢鐮刀菌等的有毒代謝產(chǎn)物,屬于鐮刀菌類毒素。T-2毒素有較強的細胞生物毒性,可破壞組織黏膜的完整性,導致免疫細胞的功能下降,引起貧血、出血。由于T-2毒素能刺激腸道黏膜,因此還會引起豬的嘔吐和腹瀉。
  煙曲霉毒素(伏馬菌素):該毒素常出現(xiàn)于玉米產(chǎn)區(qū),它對機體呼吸道的損傷比較嚴重。有的豬場呼吸道問題總是反復難以治愈,可考慮是不是煙曲霉毒素在其中作怪。另外該毒素中毒后豬的生產(chǎn)性能和繁殖性能也遭到破壞,明顯的癥狀是胚胎發(fā)育受損,免疫機能降低。
  麥角毒素:由麥角菌產(chǎn)生,該毒素可縮小血管,限制血液的供給,尤其是限制血液向乳腺和機體末梢的供應。對于霉菌毒素的危害,預防是主要的,不要使用發(fā)生霉變的飼料及原料。我們在購進玉米等原料時,要認真挑選,不要圖一時便宜給自己留下后患,盡量在源頭上做到杜絕霉菌毒素。但是,天氣也是一個不容忽視的因素,在當前潮濕高溫的天氣里,妥善保存飼料顯得尤為重要。

霉菌毒素的種類及危害


二、霉菌毒素的快速定量檢測方法

      目前檢測霉菌毒素的主要分為兩大類:即確認方法和快速方法。確認方法主要基于理化儀器設備,如薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)和各種聯(lián)用技術如氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)、液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化學基礎上的免疫分析方法如免疫親合柱-熒光檢測(IAC-FLD)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELlSA)和膠體金免疫層析方法等。

      結(jié)果準確、法定認可是理化方法最大的優(yōu)點,但是儀器設備價格昂貴,前處理過程復雜、操作繁瑣、效率低,成本極高,因此不適用于大規(guī)模樣本的篩查和日常的內(nèi)控檢測。酶聯(lián)免疫吸附法ELISA 方法和膠體金快速檢測卡是企業(yè)常用的快速檢測方法,但也均存在各自的優(yōu)缺點:ELISA 方法能靈敏度相對較高,且能定量檢測,但操作的過程相對復雜,步驟較多,檢測時間較長,對環(huán)境和人員要求高,環(huán)境和基質(zhì)干擾嚴重,且需要使用標準品,對操作人員危害比較大;膠體金檢測卡可以滿足現(xiàn)場快速的要求,能在5-10min內(nèi)快速測定,但是只能定性,且靈敏度較低,肉眼觀察主觀性較強,重復性差。

      上海飛測生物科技有限公司基于領先的熒光定量FPOCT技術平臺,開發(fā)出了國內(nèi)首套霉菌毒素熒光定量快速檢測系統(tǒng)(包含霉菌毒素熒光定量快速檢測試紙條和霉菌毒素熒光定量檢測儀),該系統(tǒng)結(jié)合了膠體金快速、酶聯(lián)免疫定量以及色譜法準確的特點,僅需8min快速準確定量的測定出糧油谷物及飼料中的霉菌毒素,包括黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素A、伏馬菌素、T2毒素等霉菌毒素的殘留含量,樣品前處理簡單(僅需8min),檢測操作簡便,靈敏度高,線性范圍寬,采用熒光免疫定量分析儀讀數(shù),結(jié)果準確可靠且可現(xiàn)場打印,準確性符合HPLC法的檢測結(jié)果,適用于各類糧油、飼料加工企業(yè)、養(yǎng)殖場、牧場、檢測機構及政府相關監(jiān)管部門。

     


2.1上海飛測霉菌毒素熒光定量快速檢測系統(tǒng)的特點

  • 8min快速準確定量: 集膠體金快速檢測、酶聯(lián)免疫定量檢測、色譜質(zhì)譜準確檢測的特點于一身,可在8min內(nèi)實現(xiàn)黃曲霉毒素的快速準確定量測定;
  • 樣品前處理六合一:只需要一次樣品前處理即可進行所有真菌毒素的定量檢測,大大減少您樣品前處理的工作量,提高工作效率。
  • 小巧便攜:既可用于實驗室常規(guī)檢測,也可用于收糧現(xiàn)場快速檢測;
  • 內(nèi)置定量標準曲線:儀器內(nèi)置標準曲線,無需檢測時再做標準曲線,既節(jié)省了成本,也避免了操作人員與霉菌毒素的接觸,保護操作人員的安全;
  • 隨到隨檢:對檢測樣本量無要求,既可單個或少量樣本隨到隨檢,也可大量樣本同時檢測,檢測成本無區(qū)別;
  • 基質(zhì)干擾小:基于時間分辨熒光技術原理,有效降低基質(zhì)干擾,既適用于小麥、玉米、高粱等原料檢測,也可對DDGS,麩皮、粕類等特殊樣本檢測,無需對提取液進行任何pH的調(diào)節(jié),操作方便,結(jié)果準確;
  • 操作簡便:樣品提取完后僅需一步加樣即可,操作及其簡便赫人性化,操作人員僅需短期培訓就能熟練掌握;
  • 遠程網(wǎng)絡支持:儀器可通過網(wǎng)絡自動進行標準曲線讀取、軟件升級、問題故障診斷、質(zhì)量控制等;
  • 數(shù)據(jù)上傳及溯源管理:熒光定量分析儀具備數(shù)據(jù)無線上傳的功能,可根據(jù)客戶的需求定制開發(fā)相應的數(shù)據(jù)管理和溯源管理系統(tǒng),實現(xiàn)公司總部對各分公司、上級監(jiān)管部門對下級監(jiān)管部門或者監(jiān)管部門對各監(jiān)管對象檢測數(shù)據(jù)的實時掌握和分析;
  • 性價比高:花膠體金試紙條的價格,獲得色譜質(zhì)譜檢測的質(zhì)量和結(jié)果,并且節(jié)省人力物力,大幅降低檢測費用;


2.2上海飛測霉菌毒素熒光定量快速檢測試紙條性能

霉菌毒素快速檢測卡性能


2.3霉菌毒素熒光定量快速檢測系統(tǒng)檢測操作過程

霉菌毒素檢測過程


2.4霉菌毒素熒光定量檢測儀性能
? 型號:FD-100
? 儀器尺寸:210mm×197mm×84mm 
? 觸屏尺寸:3.5英寸 
? 重量:1.4kg霉菌毒素檢測儀
? 激發(fā)光源 :LED
? 激發(fā)光譜 中心波長λ0=365nm
? 接收光譜 中心波長λ1=610nm
? 接口:RS232、USB
? 打?。簝?nèi)置熱敏打印機
? 數(shù)據(jù)儲存:≥10000條
? 檢測時間:8秒/個
? 檢測通量:450個/小時
? 臺內(nèi)精密度   CV≤0.5%(大于50%光強)
? 臺間精密度   CV≤1.0%(大于50%光強)
? 儀器信噪比:0.01%(1:10000)
? 帶一維碼、二維碼掃描參數(shù)輸入模塊
? 帶無線傳輸模塊

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