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小麥中嘔吐毒素(DON)熒光定量8min快速檢測系統(tǒng),國糧局權(quán)威驗證

時間:2018-05-08來源:上海飛測點擊量:

一、嘔吐毒素危害及檢測方法介紹
    嘔吐毒素,學(xué)名脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON),是單端孢菌素烯烴中的一種,其通常是由生長在谷類物品(如小麥、玉米、大麥和秣草)霉菌鐮紅菌素生成的。近年來發(fā)現(xiàn),嘔吐毒素DON可能與人類的食管癌、IgA腎病有關(guān)。人畜攝入了被DON污染的食物/飼料后,會出現(xiàn)厭食、嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)、反應(yīng)變得遲鈍等急性中毒的癥狀,嚴(yán)重時可損害造血系統(tǒng)造成死亡。研究表明,DON可能對免疫系統(tǒng)有嚴(yán)重的影響,有明顯的胚胎毒性和一定的致畸作用,可能有遺傳毒性,但無致癌、致突變作用。由于DON的嚴(yán)重影響,引起了各國的普遍重視。

    嘔吐毒素作為一種常見的真菌毒素,在自然界中廣泛存在于小麥等糧谷類農(nóng)作物中,在世界范圍內(nèi)存在著較高的污染率,小麥一旦被嘔吐毒素產(chǎn)毒菌株污染,在適宜生長環(huán)境(水分活度 Aw>0. 87)中,產(chǎn)毒菌株會迅速生長,產(chǎn)生嘔吐毒素,而小麥中的嘔吐毒素又會隨小麥粉的生產(chǎn)過程帶入到面粉中,嚴(yán)重威脅人體健康。我國 2013 年國家風(fēng)險監(jiān)測計劃已將小麥和面粉中嘔吐毒素含量的監(jiān)測列為重點。
目前嘔吐毒素的檢測方法主要分為兩大類:即確認(rèn)方法和快速方法。確認(rèn)方法主要基于理化儀器設(shè)備,如薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)和各種聯(lián)用技術(shù)如氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)、液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化學(xué)基礎(chǔ)上的免疫分析方法如免疫親合柱-熒光檢測(IAC-FLD)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELlSA)和膠體金免疫層析法等。

結(jié)果準(zhǔn)確、法定認(rèn)可是理化方法最大的優(yōu)點,但是儀器設(shè)備價格昂貴,前處理過程復(fù)雜、操作繁瑣、效率低,成本極高,因此不適用于大規(guī)模樣本的篩查和日常的內(nèi)控檢測,一般僅用于最終的確證。酶聯(lián)免疫吸附法ELISA 方法和膠體金快速檢測卡是企業(yè)常用的快速檢測方法,但也均存在各自的優(yōu)缺點:ELISA 方法能靈敏度相對較高,且能定量檢測,但操作過程相對復(fù)雜,對環(huán)境和人員要求高,環(huán)境干擾因素復(fù)雜,重復(fù)性較差;膠體金檢測卡可以滿足現(xiàn)場快速的要求,能在5-10min內(nèi)快速測定,但是只能定性,且靈敏度較低,肉眼觀察主觀性較強,重復(fù)性差。

二、小麥和面粉中嘔吐毒素國家殘留限量標(biāo)準(zhǔn)
小麥面粉限量

引自:《GB 2761-2011 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量》。

三、上海飛測小麥中嘔吐毒素?zé)晒舛靠焖贆z測系統(tǒng)
    上海飛測生物基于熒光定量FPOCT技術(shù)平臺,開發(fā)了嘔吐毒素?zé)晒舛靠焖贆z測系統(tǒng),該系統(tǒng)結(jié)合了膠體金快速、酶聯(lián)免疫定量以及色譜法準(zhǔn)確的特點,可在8min內(nèi)快速準(zhǔn)確定量的測定出大麥、小麥中的嘔吐毒素的含量,樣品前處理簡單(僅需7min),操作簡便,只需一步加樣,無需標(biāo)準(zhǔn)品,無需做標(biāo)準(zhǔn)曲線,采用熒光免疫定量分析儀讀數(shù),結(jié)果準(zhǔn)確可靠且可現(xiàn)場打印,準(zhǔn)確性高度符合HPLC法的檢測結(jié)果,為嘔吐毒素的快速檢測和控制提供了一種全新的技術(shù)手段,適用于各類小麥?zhǔn)諆?、加工企業(yè)、檢測機構(gòu)及政府相關(guān)監(jiān)管部門。
上海飛測生物藥材中黃曲霉毒素B1快速定量檢測方案--8min準(zhǔn)確定量
3.1.嘔吐毒素?zé)晒舛繖z測試紙條性能
?檢測靈敏度:25μg/kg;
?定量線性范圍:100μg/kg - 5000μg/kg;
?樣品前處理時間:7min;
?檢測時間:8min;
?準(zhǔn)確度:回收率為80%-125%;

?特異性:在10000μg/kg濃度水平下與其它真菌毒素?zé)o交叉反應(yīng);

黃曲霉毒素B1熒光定量快速檢測系統(tǒng)

3.2.樣品前處理過程
1、粉碎;
2、振蕩提?。?min);

3、離心(2min);

樣品前處理過程

3.3.檢測操作過程
1、稀釋;
2、加樣反應(yīng)(8min);
3、讀數(shù),打印檢測報告;

檢測操作視頻地址:http://v.youku.com/v_show/id_XMjg0NjY5MzUwOA==.html

花生中黃曲霉檢測操作過程

3.4.結(jié)果判讀和輸出

    采用便攜式嘔吐毒素?zé)晒舛繖z測儀進行讀數(shù),檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確、客觀,避免人為的誤判。

上海飛測生物霉菌毒素檢測儀

    檢測結(jié)果將呈現(xiàn)于熒光讀數(shù)儀液晶顯示屏上,同時可按打印鍵打印獲得紙質(zhì)的檢測報告,另外,開通儀器的WIFI數(shù)據(jù)上傳功能后,檢測相關(guān)數(shù)據(jù)信息將自動上傳至“食品安全溯源管理云平臺”,便于溯源及質(zhì)量管理。
           
3.5.上海飛測熒光定量FPOCT技術(shù)平臺與其他方法學(xué)技術(shù)性能的對比
3.6.上海飛測嘔吐毒素?zé)晒舛靠焖贆z測方法優(yōu)點
8min快速準(zhǔn)確定量檢測:集膠體金快速檢測、酶聯(lián)免疫定量檢測、色譜質(zhì)譜準(zhǔn)確檢測的特點于一身,可在8min內(nèi)實現(xiàn)嘔吐毒素的快速準(zhǔn)確定量測定;
內(nèi)置定量標(biāo)準(zhǔn)曲線:儀器內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線,無需使用標(biāo)準(zhǔn)品,無需檢測時再做標(biāo)準(zhǔn)曲線,既節(jié)省了成本,也避免了操作人員與嘔吐毒素的接觸,保護操作人員的安全;
行標(biāo)支持,國糧局權(quán)威驗證:基于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)LST6113-2015,并通過國糧局及農(nóng)科院的權(quán)威驗證;
樣品前處理簡單:前處理方法簡單快速,無需對提取液進行pH的調(diào)節(jié),大大提升檢測的便捷性和檢測效率;
隨到隨檢:無需做標(biāo)準(zhǔn)曲線,對檢測樣本量無要求,既可單個或少量樣本隨到隨檢,也可大量樣本同時檢測,檢測成本無區(qū)別;既可用于實驗室常規(guī)質(zhì)控檢測,也可用于收糧現(xiàn)場檢測,確保原料收購的質(zhì)量;
操作簡便:對配套的儀器設(shè)備和檢測人員要求低,操作人員僅需短期培訓(xùn)就能熟練掌握;
樣本適用范圍廣:采用時間分辨熒光專利技術(shù),抗基質(zhì)干擾強,樣本適用性廣,既可檢測小麥、玉米、大米等原糧,也可檢測各種粕類、麩皮、DDGS等飼料原料,還可檢測花生油、玉米油等各種植物油;
遠程網(wǎng)絡(luò)支持:儀器可通過網(wǎng)絡(luò)自動進行標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取、軟件升級、問題故障診斷、質(zhì)量控制等;
數(shù)據(jù)上傳及溯源管理:熒光定量分析儀具備數(shù)據(jù)無線上傳的功能,可根據(jù)客戶的需求定制開發(fā)相應(yīng)的數(shù)據(jù)管理和溯源管理系統(tǒng),實現(xiàn)公司總部對各分公司、上級監(jiān)管部門對下級監(jiān)管部門或者監(jiān)管部門對各監(jiān)管對象檢測數(shù)據(jù)的實時掌握和分析;
性價比高:花進口設(shè)備三分之一的價格,獲得色譜檢測的質(zhì)量和結(jié)果,并且節(jié)省人力物力,大幅降低檢測費用;


FD-100型嘔吐毒素?zé)晒舛繖z測儀基本參數(shù)及性能
1、儀器尺寸:210mm×197mm×84mm ,觸屏尺寸:3.5英寸,重量:約1kg,輕巧便攜,體積精巧,既適合實驗室操作,也適合現(xiàn)場操作;
2、激發(fā)光源采用LED,激發(fā)光譜波長λ0=365nm,接收光譜波長λ1=610nm;并且具有時間分辨熒光功能,讀數(shù)時間為200us-600us,提高檢測的準(zhǔn)確度和特異性;
3、測量重復(fù)性:臺內(nèi)精密度CV≤1.0%;臺間精密度CV≤1.5%;儀器信噪比:0.01%
4、內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過ID卡導(dǎo)入標(biāo)準(zhǔn)曲線,不需要現(xiàn)場定標(biāo);
5、通過儀器內(nèi)置光電掃描儀掃描條形碼切換不同檢測項目和批號,檢測項目包括黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素、伏馬菌素、T-2毒素等;
6、儀器檢測響應(yīng)時間小于8秒,定量檢測結(jié)果顯示與液晶屏上,顯示的結(jié)果包括項目名稱、濃度、陰陽性判斷,參考范圍等;
7、可通過內(nèi)置熱敏打印機,也可通過RS232、USB接口傳輸?shù)诫娔X,還可通過WIFI無線模塊實現(xiàn)數(shù)據(jù)的遠程傳輸,實現(xiàn)檢測數(shù)據(jù)和信息的溯源管理及大數(shù)據(jù)分析;
8、可存儲記錄檢測時間,樣品編號,產(chǎn)品批次、檢測值、陰陽性判斷等多種信息,數(shù)據(jù)儲存≥10000條;
9、可根據(jù)日期、檢測項目進行檢索;
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